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高校生物 遺伝子発現量の比較—RNA量とタンパク質量の違いを説明する|武蔵野個別指導塾

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時系列の相対量や細胞ごとの平均を計算し、mRNAとタンパク質の変化を合成と分解の収支から検討します。

よくあるのは、高校生が時系列の表を見て、RNA量が増えた時点でタンパク質量も同じ割合で増えると読む場面です。転写と翻訳はつながっていますが、両方の量を同じ時計で増減させる決まりはありません。各時点に残っている量は、作られた分と分解された分の差の積み重ねです。どの値を基準にし、何を測ったのかを先に押さえて、資料が示す変化と原因の候補を分けて考えます。

要点(結論から)

  • mRNA量とタンパク質量は、それぞれ合成と分解の収支で決まります。
  • 倍率は同じ物質の同じ基準を分母にして求めます。
  • 対照群、時刻、細胞あたりか全体かをそろえます。

表から何を問われるか

資料の出方には、時刻ごとのmRNA量とタンパク質量を比較する型、処理群と対照群を比較する型、細胞ごとの値と集団の平均を比較する型があります。いずれも、表の数値を読む前に、対象の遺伝子、測定した物質、採取時点、比較の基準を確認します。数値は以下の例題と練習のために作った相対量で、実測値ではありません。

例えば、処理前をそれぞれ1とした2種類の値は、同じ1でも同じ分子数を意味しません。mRNAが2、タンパク質が1.2なら、それぞれの処理前に対して2倍、1.2倍です。2と1.2を引いて物質の量の差とすることもできません。単位と基準をそろえた同種の測定値どうしを比べます。

グラフなら横軸の時刻と縦軸の名称・単位を読み、線が水平か上向きかを見ます。水平な線は量が変化していないことを表しますが、合成が止まったことを意味しません。合成と分解が同じ速さで進んでいる場合もあるからです。また、測定時点の間の経過は、点を結んだ線だけでは確定できません。採取間隔より短い変化があっても、表に現れないことがあります。

発現量は作る量と残る量で決まる

遺伝子の情報をもとにRNAが作られる過程が転写です。mRNAはアミノ酸の配列を指定する鋳型として翻訳に使われ、分解の対象にもなります。翻訳で作られたタンパク質も分解されます。図1の矢印は情報を用いて次の物質が作られる関係を示し、物質そのものが矢印に沿って変形するという意味ではありません。

図1 転写と翻訳およびそれぞれの分解の関係

図1のように、mRNAとタンパク質には別々の増加と減少の道があります。ある時刻のmRNA量は転写速度そのものではありません。ある期間の増減は、その間に作られた量から分解された量を引いた結果です。タンパク質にも同じ収支が成り立ちます。これは収支の説明であり、表にない合成速度を数値として決める式ではありません。

mRNAが増えても、翻訳に使われる程度やタンパク質の分解の影響が異なれば、タンパク質量の変化率は一致しません。タンパク質が後から増える資料なら、mRNAの増加後に翻訳産物が蓄積することは説明の候補です。ただし時間差だけでは、翻訳速度が変わったのか、分解速度が変わったのかを区別できません。mRNAが減ってもタンパク質の分解が遅ければ、タンパク質量がしばらく高いままの可能性もあります。

細胞の種類によって同じ遺伝子の発現量が異なることもあります。集団全体の平均は、細胞ごとの値を足して細胞数で割った値です。平均が同じでも、どの細胞も同程度の量を持つ場合と、一部に集中する場合があります。平均だけで個々の細胞が同じ状態にあるとは言えません。集団の比較で細胞の種類や割合が変わった場合は、細胞内の調節が変わった可能性と、集団の構成が変わった可能性を分けます。

測定の基準も結果の一部です。細胞あたりの量、試料全体の量、別の量を基準にした相対量は、分母が違います。細胞数が変われば試料全体の量が変わっても、細胞あたりは同じかもしれません。逆に細胞あたりの量が変わっていても、細胞数の変化がそれを打ち消すことがあります。比較するときは分母を明示し、異なる基準の数値を直接比べないようにします。

基本例題:時刻をそろえて倍率を読む

同じ種類の細胞について、処理群と、処理を加えない対照群を同時に調べました。各値は同じ群の時刻0の細胞あたりの量を1.0とした相対量です。測定条件は両群で同じで、測定のばらつきの目安は各値について±0.1です。表は問題用の値です。処理群の時刻2におけるmRNAとタンパク質の倍率をそれぞれ小数で答え、時刻0から2の変化の違いを説明してください。横軸は時刻、縦軸は各物質の時刻0を1.0とした相対量です。

時刻 処理群mRNA 処理群タンパク質 対照群mRNA 対照群タンパク質
0 1.0 1.0 1.0 1.0
1 2.0 1.1 1.0 1.0
2 3.0 1.5 1.0 1.0

図2のRはmRNA、Pはタンパク質です。図2のように、時刻2では同じ列の2値を読みます。横方向に時刻、縦方向にそれぞれの相対量を置き、対照群も同じ時刻に読みます。

図2 基本例題の時系列と対照群の比較

まずmRNAは時刻0の1.0から3.0なので、3.0 ÷ 1.0 = 3.0倍です。タンパク質は1.0から1.5なので、1.5 ÷ 1.0 = 1.5倍です。元の基準に倍率を掛け戻すとそれぞれ3.0と1.5になり、表の時刻2に戻ります。どちらも増加していますが、増加率は同じではありません。時刻1でもmRNAは2.0、タンパク質は1.1で、変化の大きさが異なります。

対照群は示された各時刻で両物質とも1.0です。処理群の変化は対照群との差として読むことができますが、この表だけで原因を転写の増加に限定することはできません。mRNAの分解の変化も量に影響するからです。±0.1は各測定値のばらつきの目安なので、時刻1のタンパク質の1.1と対照の1.0の差0.1は、その目安と比べて小さく、明確な差と断定しません。時刻2の差0.5は目安より大きいものの、それだけで原因は確定しません。

別の見方として、処理群と対照群の同時刻の差を並べる方法もあります。時刻2のmRNAの差は2.0、タンパク質の差は0.5です。各物質内の比較を見やすくできますが、物質どうしの差の大きさを分子数の差として比べてはいけません。対照の基準値が0の場合は倍率を計算できないため、差や検出の状況を別に記述します。

標準例題:同じ平均でも内訳は違う

同じ遺伝子のタンパク質量を細胞ごとに測り、同じ基準の相対単位で示します。各値の測定のばらつきの目安は±0.1相対単位です。細胞群Aの4細胞は1.0、1.0、1.0、1.0、細胞群Bの4細胞は0.0、0.0、0.0、4.0です。各群の平均を小数第1位まで求め、平均から言えることと言えないことを答えてください。0.0はこの問題で測定された値で、存在しないことの証明ではありません。

Aは合計4.0を4細胞で割って1.0、Bも合計4.0を4細胞で割って1.0です。平均に細胞数を掛け戻すと両群の合計が4.0相対単位となり、与えられた値と一致します。同じ平均でも、Aは4細胞が同じ値、Bは1細胞に高い値が集中しています。各群の細胞数が同じ場合の平均は同じでも、細胞ごとの分布は異なります。

ばらつきの目安を考えても、この問題の両群の内訳には大きな違いがあります。しかし、この4細胞が各群の全体を代表するとは、問題の条件だけでは言えません。多くの細胞を調べるとしても、採取の偏りや測定できない細胞があると分布の推定に影響します。平均に加えて個々の値や分布を示すこと、同じ基準で測ることが比較には必要です。

発展例題:量の変化から原因を絞る

細胞あたりのmRNA量とタンパク質量を、処理群と無処理の対照群で同時刻に測ります。両群とも時刻0の各物質の量を1.0とします。処理群の時刻3のmRNA量は1.0、タンパク質量は2.0、対照群はそれぞれ1.0、1.0でした。各値のばらつきの目安は±0.1です。処理群で翻訳が増えたと断定できるか、理由と追加したい比較を記述してください。横軸は時刻、縦軸は各物質の時刻0を1.0とした相対量です。

処理群のmRNA量は時刻0と同じで、タンパク質量は2.0倍です。対照群では各値が1.0なので、タンパク質の処理群と対照群の差は1.0です。差を対照の1.0に足すと処理群の2.0に戻ります。この差は与えられたばらつきの目安より大きいものの、タンパク質量の変化は翻訳による合成と分解の両方に左右されます。翻訳が増えた場合にも、分解が減った場合にも、この方向の変化が起こりえます。

したがって翻訳の増加とは断定できません。候補を区別するには、同じ時刻の両群でタンパク質の合成に関する測定と分解に関する測定を別々に比較します。両方を測ると、量が増えたという結果をどの収支の変化が説明するか検討できます。それでも測定の誤差や、処理が複数の過程に及ぶ可能性を考える必要があります。

対照群は処理以外の条件をそろえて比べるために必要です。さらに測定の基準となる物質そのものが処理で変わるなら、見かけの相対量も変化しえます。細胞数や基準の安定性を独立に確かめ、複数の試料を測ってばらつきを評価します。ここで示した値は例題の条件であり、実際の測定精度や再現性を示すものではありません。

誤答を直す:数値と原因を飛び越えない

図3のように、観測された量から原因へ進むときは、間にある合成と分解を確かめます。矢印は推論の順序を表しています。

図3 観測値から合成と分解を経て原因を考える順序

誤答の一つは「mRNAが3倍なのでタンパク質も3倍」です。mRNAの情報に従ってアミノ酸がつながる一方で、現存するタンパク質量は、それまでの合成と分解の結果です。修正すると「mRNAは3倍だが、タンパク質は別の測定値を用いて倍率を求める」となります。増加の方向だけが共通していても、倍率まで同じとは限りません。

次は「mRNA量が変わらないので転写も変わらない」です。量が一定であることは、転写による増加と分解による減少がつり合っている場合にも成り立ちます。転写と分解がともに変化していても、同じ量が保たれる可能性があります。一定という観測は書けますが、各過程の速度をそれだけで断定しないようにします。

もう一つは「対照との差が少しでもあれば処理の効果が証明された」です。測定値にはばらつきがあり、わずかな差は測定誤差と区別できないことがあります。与えられた誤差の目安、繰り返し測定、試料の取り方を見て、差の評価に足りるか考えます。目安がない表なら、数字の大小は読めても差の確かさまでは判断できません。

練習:まず5問を解く

以下の値は練習用に作ったものです。特に断りのない限り、各群の時刻0を各物質について1.0とした細胞あたりの相対量で、各値のばらつきの目安は±0.1です。時系列の横軸は時刻、縦軸はそれぞれの相対量です。

  1. 処理群の時刻0のmRNA量は1.0、時刻4は2.5、タンパク質量はそれぞれ1.0と1.8です。対照群は両時刻とも両物質が1.0です。処理群の2種類の時刻4の倍率を小数で答え、同率かどうか述べてください。
  2. 処理群の時刻0と時刻5のmRNA量はともに1.0、タンパク質量は1.0と2.4です。対照群は両時刻とも両物質が1.0です。処理群で翻訳速度が上がったと断定できるか、分解に触れて答えてください。
  3. ある群の3細胞で測った同じタンパク質量は0.3、0.6、2.1相対単位です。各値のばらつきの目安は±0.1相対単位です。平均を小数第1位で求め、平均から個々の細胞に同じ量があると言えるか答えてください。
  4. ある試料の細胞数が8から12に変わり、細胞あたりのタンパク質量は同じ基準で2.0相対単位のままでした。この問題では各値を正確な条件とします。各時刻の試料全体の量を相対単位で求め、全体量が増えた理由を述べてください。
  5. 同時刻の処理群と対照群のmRNA量はそれぞれ1.2と1.1です。各測定値のばらつきの目安は±0.2です。差を小数で求め、その差から処理の効果を明確に判定できるか、追加の確認とともに答えてください。

練習の答えと考え方

  1. mRNAは2.5 ÷ 1.0で2.5倍、タンパク質は1.8 ÷ 1.0で1.8倍です。両方の基準1.0に各倍率を掛けると、時刻4の値に戻ります。ともに増加していますが同率ではありません。対照群の値も見ると、処理群の変化を無処理の場合と比較できます。
  2. 断定できません。mRNA量が同じでも、タンパク質量は翻訳による合成と分解の収支で変わります。分解が減った場合にも蓄積しえます。合成と分解を別々に測り、同時刻の対照群と比較することが必要です。2.4倍という量の変化から、翻訳速度の倍率を直接計算することはできません。
  3. 合計は3.0相対単位なので、3細胞で割った平均は1.0相対単位です。平均1.0に3を掛ければ合計3.0に戻ります。個々の値は大きく異なるので、平均を各細胞の値とみなせません。±0.1の目安を考えても、0.3と2.1の差は大きいです。
  4. 初めの全体量は8・2.0で16.0相対単位、後の全体量は12・2.0で24.0相対単位です。それぞれ細胞数で割ると2.0に戻ります。細胞あたりの量は一定なので、全体量が増えたのはこの条件では細胞数が増えたためです。全体量だけを見て、各細胞の発現が増えたと結論することはできません。
  5. 差は1.2 − 1.1で0.1です。対照群の1.1に0.1を足すと処理群の1.2に戻ります。差は各値のばらつきの目安0.2より小さいため、効果があると明確には判定できません。独立した試料で繰り返し、測定のばらつきと基準の安定性を調べます。差が小さいことは、効果が存在しない証明でもありません。

要点を手元に残す

答案のどこで止まったか

個別指導で答案を確かめるときは、まず倍率の分母に何を書いたかを見ます。物質ごとの時刻0が分母になっていなければ、同じ物質の初めの量へ線を引いて問い返します。倍率は合っているのに原因を断定している場合は、合成と分解のどちらが変わっても同じ結果になりうるかを考えます。平均から全細胞を判断している場合は、同じ平均になる別の内訳を作ってもらいます。観測と説明の境界を答案に書けると、資料の数値が根拠として働きます。

読んで終わりにするか、ここから変えるか。

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