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高校生物 チャネルと担体—輸送量のグラフから膜タンパク質の働きを比べる|武蔵野個別指導塾

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濃度別の取り込み量から飽和の傾向を読み、輸送方向を加えて促進拡散と能動輸送の判定を考えます。

よくあるのは、膜を通る物質の輸送量が飽和すると、必ず能動輸送だと判断する場面です。濃度を上げても輸送量が頭打ちになることと、濃度差に逆らって運ぶことは、同じ意味ではありません。まずグラフの縦軸が何を測り、膜のどちら側の濃度を横軸にとったかを確かめます。

問いの形には、内外の濃度から正味の移動方向を選ぶもの、濃度と輸送量の表から飽和を読み取るもの、阻害や対照実験から候補を絞るものがあります。いずれも、観察した事実とその説明を分けることが出発点です。ここでは膜タンパク質を介する輸送を中心に扱い、能動輸送の詳しい仕組みは立ち入りません。

通り道と形を変える運び手

細胞膜の脂質二重層は、物質に対して一様な通路ではありません。イオンや水に溶けやすい物質は疎水性の膜内部を通りにくく、膜タンパク質が通過を助ける場合があります。チャネルは膜を横切る親水性の通り道をつくり、通りやすい物質を選びます。開閉するものもあります。担体は運ぶ物質と結合し、形を変えて膜の反対側に放すものとして考えます。

図1は膜の一部を拡大した模式図です。上を細胞外、下を細胞内とし、矢印は物質の移動を表します。図1のように通路を通る場合と、結合と形の変化を経る場合では、通過の描き方が違います。図は機構を単純化したもので、タンパク質の実際の形や数の比率を示していません。

図1 膜を隔てたチャネルと担体による移動の模式図

選択性とは、どんな物質でも同じように通すのではなく、物質の性質によって通しやすさが異なることです。ある物質が通らない結果は選択性の手がかりになりますが、通路が閉じていた可能性や測定感度も調べなければ、結合できないとまでは言えません。チャネルと担体の両方に選択性があるので、選択性があるという事実だけで種類を決めることもできません。

促進拡散は膜タンパク質を介し、濃度差に従う正味の移動です。輸送そのものにATPの直接消費を必要としません。中性の溶質なら、高濃度側から低濃度側へ正味に移動します。反対向きの個々の移動が全くないという意味ではなく、両方向の差が高濃度側から低濃度側へ向くという意味です。濃度が等しくなれば、この単純な条件では正味の移動はなくなります。

イオンでは電荷の影響も受けます。濃度差だけで方向を判断する問題では、中性の物質を使うか、電気的な影響を無視できると条件に置きます。濃度差に逆らう正味の輸送にはエネルギーの供給が必要ですが、供給の形は直接ATPを使う場合に限りません。したがってATPを直接使わないという情報だけでも、すべての輸送が促進拡散とは言えません。

担体は有限の数しかなく、結合して運ぶ過程には時間がかかります。濃度を上げて多くの担体が輸送に関わるようになると、単位時間当たりの輸送量は増えにくくなります。これが飽和の考え方です。ただし、飽和は担体が関わる可能性を示す特徴であって、促進拡散か能動輸送かを一意に決める証拠ではありません。チャネルでも条件次第で通過量に限界が現れるため、曲線の形だけでタンパク質の種類も断定しません。

基本例題:増加の幅を見る

中性の物質Aについて、細胞外濃度を変え、一定の短い時間に細胞内へ入った正味の量を調べました。細胞内の初濃度は各回とも0、細胞数と測定時間は同じです。次は教材用の値であり、実測値ではありません。量は任意単位です。

外液の濃度(任意単位) 1 2 3 4
正味の取り込み量(任意単位) 4 7 9 10

濃度を1ずつ増やしたときの取り込み量の増加分を整数で求め、グラフの特徴と、この表だけで能動輸送と断定できるかを答えてください。

まず横軸に外液濃度、縦軸に一定時間の正味の取り込み量をとります。図2の点は表の値に対応し、線分は隣り合う測定点を結んだものです。図2のように、右に進むほど点の上がり方が小さくなっています。線分の間の値や、測定範囲外での形は確定していません。

図2 外液濃度と一定時間の正味取り込み量の関係

順に差をとると、7 − 4 = 3、9 − 7 = 2、10 − 9 = 1です。増加分は3、2、1任意単位で、取り込み量は増えながら増え方が小さくなっています。飽和に近づく傾向と読めますが、この範囲だけでは最大値そのものは確定できません。

内側が0で外側が正なので、開始時の正味の取り込みは濃度差に沿います。担体による促進拡散でもこうした傾向は生じるため、飽和傾向だけでは能動輸送と断定できません。差を元に戻すと4に3、2、1を順に加えて7、9、10となり、表に一致します。測定中に内側濃度が変化することにも注意し、開始時と測定時間全体の条件を区別します。

標準例題:対照を引いて比較する

同じ条件の膜試料に物質Bを与えました。タンパク質を含む試料の正味取り込み量は短い一定時間に18任意単位、タンパク質を含まない対照では同じ時間に6任意単位でした。対照の値は膜タンパク質以外による通過と測定上の背景を合わせたものとし、試料でも同じ大きさと仮定します。タンパク質に関連する正味量を整数で求め、何が言えるか述べてください。

差は18 − 6 = 12任意単位です。対照の6を戻すと12 + 6 = 18となり、観測値に戻ります。タンパク質に関連する成分があると考えられますが、これだけでチャネルか担体か、濃度差に沿うか逆らうかは決まりません。対照と試料の膜面積や物質濃度が違えば、差はタンパク質の有無以外も反映します。

別解として、全体18のうち背景6を除いた残りを考えても12です。ただし背景が試料でも6という仮定が崩れると、差をそのままタンパク質の働きとみなせません。例えばタンパク質を入れる操作が膜の破損を増やすなら、対照との差には漏れも含まれます。膜の状態を別に調べる必要があります。

発展例題:向きの情報を足す

中性の物質Cを通す膜を調べます。開始時の濃度は外側8、内側2任意単位です。短時間後、外側から内側への移動量は15、内側から外側への移動量は5任意単位でした。両方向を別々に測れ、他の出入りはないものとします。正味の移動量と方向を整数で答え、促進拡散と矛盾するか考えてください。

外向きの5を内向きの15から引き、正味は外側から内側へ10任意単位です。戻して考えると、内向きの正味10に外向き5を加えれば内向きの実際の15が得られます。開始時は外側の濃度が高いため、この向きは促進拡散と矛盾しません。ただし向きが一致しても、それだけで促進拡散と証明したことにはなりません。測定中に濃度差が反転していないことや、別の駆動の有無も調べます。

逆に、内側が高い状態で内向きの正味移動が続くなら、中性のCについて濃度差に逆らう輸送を示します。正味の向きと、それぞれの方向の移動を混同しないことが重要です。両方向の量が同じなら、分子が動いていても差は0になります。

実験を設計し、結果の限界を読む

外液濃度と取り込み量の関係を調べるなら、変える条件は外液濃度、測る結果は定めた時間内の正味量です。膜面積、細胞数、温度、初めの内側濃度、測定時間をそろえます。横軸には濃度とその単位、縦軸には量とその単位を書き、異なる測定時間の量を同一の速さとして扱わないようにします。短い時間の平均速度を比べるなら、量を時間で割り、その時間も明示します。

濃度差の向きを変えた条件を追加すれば、移動方向が濃度差とどう対応するかを調べられます。さらに輸送に関わるタンパク質を除いた対照、処理の影響を受けない対照を設ければ、差の解釈を絞れます。ATP供給を妨げる処理で量が減っても、膜が傷んだり間接的に濃度差が変わったりする可能性があります。その処理だけから直接ATPを使うと決めず、膜の状態と内外濃度を別に測ります。

実験は繰り返し、ばらつきの範囲を見ます。測定値が検出限界に近い場合は、差が見えないことと輸送がないことを区別します。測定器の故障や試料の漏れが疑われる場合は、その値を根拠に機構を決めず、原因を点検して測定をやり直します。操作は学校の指導の下で行います。

誤答を直す:飽和から先を飛ばさない

「輸送量が飽和した。だからATPを使う能動輸送だ」という答えは、観察と結論の間に必要な条件が欠けています。図3のように、飽和から読み取れるのは濃度を上げても増加が小さくなるという傾向です。促進拡散の担体にも、能動輸送に関わる担体にも、有限の数と輸送に要する時間があります。

図3 飽和から輸送方式を決める誤りと必要な条件

直すときは「飽和傾向があり、担体の関与と整合する。ただし輸送方式の判定には濃度差と正味の方向などが必要」と書きます。実際に濃度差に逆らう正味の移動が示された場合は、単純な促進拡散では説明できません。飽和の有無と方向の判定は別々の根拠として並べます。

練習問題

次の数値は教材条件です。量と濃度の任意単位は各問の中で共通です。計算結果は整数で答えてください。

  1. 中性の物質Dの開始時濃度は外側9、内側3です。促進拡散による開始時の正味の方向を答えてください。
  2. 外液濃度を1から2、3へ変えると、一定時間の正味量がそれぞれ2、5、7でした。各区間の増加分を求めてください。
  3. 膜試料の取り込み量が25、背景を表す対照が9です。背景が試料でも同じと仮定したとき、差を求めてください。
  4. ある物質の外向き移動量が13、内向き移動量が4でした。他の出入りはありません。正味の方向と量を求めてください。
  5. 輸送量が濃度の増加とともに頭打ちになりました。能動輸送と断定できるか、理由と追加で必要な情報を述べてください。

答えと解き方

  1. 外側から内側です。9が3より高く、中性物質の促進拡散は濃度差に沿います。逆向きでは低濃度から高濃度への正味移動となり、条件に合いません。
  2. 順に3、2です。5 − 2 = 3、7 − 5 = 2で、元の2に順に加えると5、7に戻ります。増加分は小さくなりますが、最大値はこの表から確定しません。
  3. 16です。25 − 9 = 16で、16 + 9 = 25に戻ります。背景が等しいという仮定に基づく差であり、それ単独では輸送方式を決められません。
  4. 外向きに9です。13 − 4 = 9で、正味の9に内向きの4を加えると外向きの13に戻ります。両方向に移動しても、その差が正味の量です。
  5. 断定できません。促進拡散に関わる担体も飽和しうるためです。内外の濃度と正味の移動方向を測り、濃度差に沿うかを調べます。頭打ちの観察を否定するのではなく、そこから言える範囲を限定します。

覚えておくこと

自分の答案を点検する

グラフから方向まで読み取ったつもりになったら、縦軸が正味量なのか一方向の量なのか、濃度は膜のどちら側かを答案の余白に書き出します。飽和を見た直後にATPと書いてしまう場合は、促進拡散でも担体が限られることを図に戻して説明してみてください。

個別指導の場では、結論を先に直す前に、横軸の条件、縦軸の量、対照との差をどこまで読めたかを言葉にして確かめます。濃度差と移動方向を対応させられれば、飽和の曲線に余計な結論を載せずに済みます。膜を越える向きと曲線の形を分けて読むことが、輸送の根拠を明確にします。

測定の途中で外液が減ったり細胞内に物質が蓄積したりすれば、開始時に与えた濃度差は一定ではありません。取り込み量を測った後にも内外の濃度を調べれば、方向を論じる際の条件をより確かにできます。とくに長時間の累積量は、その間ずっと同じ速さで輸送された証拠にはなりません。

また、膜タンパク質を加えた試料と加えない試料の差が小さいときは、反復測定のばらつきと比べます。差が見えても、それが処理に伴う膜の変化から生じた可能性は残ります。条件を一つずつ変えて対照を整えることで、観察と説明の距離を縮められます。

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